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药理研究
   

灵芝对实验性血栓形成及人体红细胞 变形能力的影响
【 整理发布:王力野生灵芝网 】 【 发布日期:7/6/2011 】  浏览次数:1950  

提要  口服灵芝浸膏具有抗大鼠血小板血栓形成与纤维蛋白血栓形成的作用,并提高人体中老化红细胞的变形能力;对大鼠凝血酶原时间及白陶土部分凝血活酶均无影响。 

关键词  灵芝;血栓形成;红细胞变形能力 

本文用日本人工培植的灵芝(Ling Zhi,LZ,Ganoderma Lucidum,Fr.Karst)提取制成的浸膏研究实验性血栓形成及人体红细胞变形能力等影响。 

材料与方法 

动物 

Wistar种大鼠,♂,由上海医科大学实验动物部提供。 

试剂 

灵芝浸膏由日本和汉生药研究所提供,为棕色粉末。 

称取5g灵芝干浸膏加入0.5%CMC溶液配制成5%混悬液,置80℃水浴振荡4h,置4℃备用。 

灵芝CMC混悬液置80℃水浴中振荡2h,离心,取上清,即为灵芝水溶液I。 

按上法振荡2h后,超声波(40W,30s)处理,离心,取上清,即为灵芝水溶液Ⅱ。 

氯化钠注射液,pH7.2~7.4,上海长征制药厂产品。 

少血浆全血均为新鲜,血型不拘,由上海市血液中心站提供。 

仪器 

DXC-300A红细胞变形能力测定仪,上海医科大学产品,DS-87A型血栓仪,江苏省丹徒科技开发服务公司产品。 

大鼠体内血小板聚集 

动物动脉血流中的血小板接触丝线的粗糙面时会粘附聚集,形成血小板血栓。当血小板的粘附聚集功能受到抑制时,血栓重量就减轻。从血栓重量可测知血小板的粘附聚集功能。大鼠于实验前禁食12~14h,随机分组,分别灌胃给药2次,前后给药间隔时间为1.5h,于第二次给药后1.5h,戊巴比妥钠(40mg/kg)腹腔注射麻醉。取一根由三段聚乙烯管组成的套管,在中段的聚乙烯管内放一根已称重约5cm长的手术丝线,用肝素NS充满聚乙烯管,将套管的两端分别插入左颈外静脉和右颈总动脉后,开启血流形成体外侧支循环。15min后终止血循环,迅速取出丝线称重,总重量减去丝线重量即为血栓湿重。对给药组和对照组的血栓湿重进行统计学处理,并以阿斯匹林作阳性对照。 

实验性大鼠血栓形成(Chandler法) 

用加硅油原料的聚乙烯塑料管,内径4mm,长60mm,旋转环半径38mm,与水平面呈74°夹角,转速18r/min,血液在环内流速419mm/min,观察15min,实验温度37±0.1℃,动态观察血栓形成全过程。以离体血液在旋转环内模拟体内血流状态,在流体效应的作用下,促使环内血小板聚集及激活凝血酶原,形成血小板与纤维蛋白血栓。给药后观察药效。 

本实验采用DS-87A型血栓仪,先由颈动脉放血1ml,入硅油化的聚乙烯塑料管内,立即置于旋转环内模拟血流状态。转动15min,倾出血栓,量其长度及称湿重。56℃烘干22h,称干重。对给药组和对照组的血栓干重进行统计学处理,并以尿激酶作阳性对照。 

人体红细胞变形能力测定 

红细胞的变形能力可用IF值(Index of Filtration)表示。IF值愈小,红细胞变形能力愈佳。 

先将人少血浆全血置于33℃孵化36h,室温中再放置48h,使红细胞自然老化,IF明显增大。再将老化的少血浆全血用NS清洗,离心,去除白细胞等,剩下的红细胞用NS配成5%左右的压积红细胞NS混悬液,并测定红细胞压积(H)。 

取上述5%红细胞悬浮液分装于试管内,每管10ml,供试验用。对照组加入800ul NS,给药组按等体积加入不同浓度的灵芝Ⅰ或Ⅱ,15~30min内分别测定对照组及各给药组的IF值。如果IF值给药组<对照组,说明该浓度药液对老化的红细胞具有恢复作用。 

结     果 

对实验性血栓形成的影响 

与其他药物比较,口服灵芝CMC混悬液500mg/kg×2具有抗大鼠体外侧支循环中血小板聚集的作用(P<0.01),和抗大鼠血小板与纤维蛋白血栓形成作用(P<0.01)。口服100mg/kg×2对上述两者均无作用, 

对人体红细胞变形能力的影响 

灵芝溶液Ⅰ在红细胞悬液的最终浓度大于10.0mg/ml对人体红细胞变形具有显著的恢复作用(P<0.01)。灵芝溶液Ⅱ在最终浓度2.0mg/ml时即显示作用(P<0.05)故认为灵芝提取液经超声波处理后能促进有效成分的溶解 

讨    论 

    灵芝的临床应用范围非常广泛,曾报道其具有抗衰老作用,并能降低血压及血浆甘油三酯。近年来国内外已用于防治高血压、冠心病及高血脂症等,也用于脑血栓的防治。灵芝尚具有抑制血小板聚集,增强细胞免疫功能,治疗慢性肝炎、皮炎、多发性肌炎、慢性支气管炎、支气管哮喘,心律失常、克山病、精神衰弱、肿瘤等。脑血栓患者红细胞变形指数与健康人的相比有明显差异。本文工作除了证明灵芝的体外抗血栓作用外,并对其影响红细胞变形能力也作了研究。实验结果指出灵芝有抗血栓形成、提高红细胞变形能力的作用,从而提供文献报道中有关灵芝疗效的实验依据。本研究表明灵芝对凝血功能并无影响。

  

 
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